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你知道核酸检测实验室是如何运作的吗?

来源: 发布日期:2020-11-25

  PCR核酸检测实验室根据国家《医学生物安全二级实验室建筑技术标准》进行建设,核酸检测实验室共分为试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区四个区域。实验室内配置全自动核酸提取仪、实时荧光定量PCR仪、扩增仪等仪器,消毒和防护设施齐全,符合相关生物实验室安全标准。此外,为防止实验室外的地方被污染,实验室的气压均为负压,有效降低感染风险。

   实验室的三个区域试剂准备区、标本处理区、扩增区很重要。检测人员们需要在一区配制好试剂,通过传递窗送至二区,在二区进行样本核酸提取,之后再送到扩增区进行基因扩增反应,等待检测结果……整个流程单向进行。

   在试剂准备区,检测人员在超净工作台前手持镊子和加样枪,将三种不同剂量的试剂从一管管试剂瓶中抽出、混合,精准加入96孔板……所有试剂配制完毕后,连同提取盒、加样枪等统一放到连通一区和二区的传递窗里。待一区的窗门关好后,位于二区的操作人员才可以打开另一侧的窗门,将试剂取出。


  在二区进行的提取加样环节,需要检测人员直接面对样本,在操作中会面临气溶胶传染的风险,是最关键也是最危险的一步,因此二区内检测人员必须严格三级防护,戴双层手套,在生物安全柜中操作。在“全副武装”以及“负压”的状态下,进行长时间、高强度的工作,对每个检测人员来说,都是一项不小的体力考验。

  为了快速、准确地对人群进行大面积筛选工作,同仁医院检验科采取“三人混检”,一次同时进行3份样本混合检测,如果混合样本出现阳性,再分别对“混检”的单一样本进行检测。因此,在核酸提取加样环节,检测人员需要先将所有样本进行双份样品标记,再每三个一组,加入到盛有核酸提取试剂的96孔板,每个孔细密排列,每个加样环节都以微升为单位,每一步操作,都要投入三倍的耐心和忍受力,容不得一点马虎。


  几个小时后,全部样本的核酸提取、与扩增检测试剂混合完毕,配置成 PCR 反应体系,再经传递窗到扩增区进行核酸扩增检测。扩增区内,3台扩增检测仪高速运转,电脑屏幕上,随着一条条内参曲线的出现,检测人员可以暂时放下悬着的心。如果样本检测为阳性,便会有两项指标呈现出S形曲线;如果检测结果为阴性,结果显示为一条直线。

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